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高通量細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的基本原理是將待檢樣品通過(guò)流式系統(tǒng)連續(xù)傳送到光學(xué)檢測(cè)區(qū)域，采用一定的探測(cè)器對(duì)細(xì)胞進(jìn)行激發(fā)并測(cè)量細(xì)胞在不同光學(xué)參數(shù)下的特性。具體步驟如下：1.激發(fā)光源：使用激光或LED等光源產(chǎn)生單一或多種波長(zhǎng)的光。這些光將通過(guò)光束整形系統(tǒng)，使其獲得理想的光束形狀。2.樣品注射：樣品通常被稀釋并加入試劑，以保證細(xì)胞在流動(dòng)時(shí)不會(huì)黏連在一起。樣品通過(guò)注射器被注入到裝有緩沖液的注射器中，并通過(guò)壓力控制一定的流速。3.水平排列：通過(guò)加速流體以及流體的層流自動(dòng)調(diào)整，使細(xì)胞在流動(dòng)時(shí)保持單個(gè)、...

細(xì)胞庫(kù)的建立可為生物制品的生產(chǎn)提供檢定合格、質(zhì)量相同、能持續(xù)穩(wěn)定的細(xì)胞。細(xì)胞庫(kù)是生物制藥的源頭，是重中之重，對(duì)于生產(chǎn)或檢定用細(xì)胞庫(kù)，各國(guó)監(jiān)管機(jī)構(gòu)一般要求三級(jí)管理，即原始細(xì)胞庫(kù)(PCB)、主細(xì)胞庫(kù)(MCB)和工作細(xì)胞庫(kù)(WCB)。PCB負(fù)責(zé)提供種子細(xì)胞，經(jīng)過(guò)不斷的克隆、篩選和鑒定后，形成MCB，再通過(guò)傳代擴(kuò)增等過(guò)程，最終形成WCB，用于大規(guī)模的生物制品生產(chǎn)。如果穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株或者商業(yè)化的細(xì)胞株為引進(jìn)和購(gòu)買(mǎi)的，也可以采用MCB和WCB組成的二級(jí)細(xì)胞庫(kù)管理。當(dāng)然，在某些特殊的情況下...

超高壓細(xì)胞破碎儀是一種用于破碎生物細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)儀器，其原理是通過(guò)施加壓力和剪切力，將細(xì)胞壁破裂，釋放細(xì)胞內(nèi)的成分。通常由液壓系統(tǒng)、壓力控制系統(tǒng)、樣品容器、破碎裝置等組成。超高壓細(xì)胞破碎儀能夠在短時(shí)間內(nèi)高效破碎細(xì)胞，釋放細(xì)胞內(nèi)的成分。相比其他破碎方法，它更加快速和高效；不需要添加任何試劑，只需施加壓力和剪切力即可破碎細(xì)胞，避免了對(duì)細(xì)胞的污染；可以根據(jù)需要調(diào)節(jié)施加的壓力和剪切力，以實(shí)現(xiàn)不同程度的細(xì)胞破碎。這對(duì)于研究不同類(lèi)型的細(xì)胞具有重要意義。1.施加超高壓力：通過(guò)液壓系統(tǒng)將細(xì)胞樣品...

超高壓細(xì)胞破碎儀可以廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域，用于提取和分離細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、DNA、RNA等生物大分子物質(zhì)。它的原理簡(jiǎn)單明了，操作簡(jiǎn)便，成為生命科學(xué)研究中破碎細(xì)胞的常用工具之一。超高壓細(xì)胞破碎儀使用中可能遇到的問(wèn)題及其解決方法：1.破碎效果不佳或不均勻：-確保使用正確的破碎管和適當(dāng)?shù)钠扑闂l件。不同細(xì)胞類(lèi)型和組織可能需要不同的壓力和破碎時(shí)間。-檢查破碎管是否正確安裝，確保破碎樣品均勻分布在破碎管中。-檢查破碎管是否有損壞，如破裂或損壞的密封圈，需要及時(shí)更換。2.破碎管磨損或破...

什么是徑向?qū)游黾夹g(shù)？傳統(tǒng)的軸向流層析技術(shù)中，其流體在柱內(nèi)從一端流向另一端，通常是柱上端往下端流動(dòng)，液流方向沿著中軸重力方向向下流動(dòng)。而徑向?qū)游黾夹g(shù)不同于傳統(tǒng)的軸向流層析技術(shù)，徑向流色譜柱流動(dòng)相攜帶樣品沿徑向遷移。徑向?qū)游鲋O(shè)計(jì)成了套筒狀，即填料形狀不是傳統(tǒng)的柱狀，而是類(lèi)似于甜甜圈的形狀，層析柱包含內(nèi)外表面，中間通道裝載填料。通常，徑向?qū)酉抵辛鲃?dòng)相從柱頂部進(jìn)入，后通過(guò)管路分散至外擋板，后垂直與中軸徑向往內(nèi)擋板流動(dòng)，填料即裝載與內(nèi)外擋板之間，如下圖所示：為了保持柱高及線流速不變，...

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01背景這篇文竟是關(guān)于拉曼自動(dòng)化反饋控制多種補(bǔ)料成分以實(shí)現(xiàn)高接種密度增強(qiáng)型fed-batch平臺(tái)過(guò)程的研究論文。該研究旨在開(kāi)發(fā)控制策略，通過(guò)在線拉曼光譜法監(jiān)測(cè)和調(diào)整代謝物濃度，以實(shí)現(xiàn)高接種密度下的細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的高產(chǎn)量和穩(wěn)定性。具體使用了增強(qiáng)型highinoculationdensity(HID)高接種密度培養(yǎng)fed-batch平臺(tái)過(guò)程來(lái)培養(yǎng)五個(gè)不同谷氨酰胺合成酶piggyBac®中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞CHO克隆。通過(guò)在線拉曼光譜法連續(xù)監(jiān)測(cè)殘余glucose葡萄糖、phen...

01背景拉曼技術(shù)在生物工藝開(kāi)發(fā)中的應(yīng)用已經(jīng)顯示出其在培養(yǎng)工藝和過(guò)程監(jiān)測(cè)的巨大潛力。但在生物工藝開(kāi)發(fā)過(guò)程中，當(dāng)克隆、培養(yǎng)基或培養(yǎng)規(guī)模等條件發(fā)生變化時(shí)，拉曼技術(shù)的性能仍面臨一些挑戰(zhàn)和限制。本研究提出了一種在線拉曼光譜分析儀實(shí)用的PAT(過(guò)程分析技術(shù))監(jiān)測(cè)方法，既可用于開(kāi)發(fā)階段，也可用于生產(chǎn)階段，以平衡生物工藝開(kāi)發(fā)過(guò)程中多個(gè)哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的不同結(jié)果。將風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估技術(shù)與開(kāi)發(fā)監(jiān)測(cè)定標(biāo)(局部模型或一般模型)的兩種方法相結(jié)合，當(dāng)多種培養(yǎng)條件發(fā)生變化時(shí)，我們能夠從作為PAT工具的拉...